zsgreen可以用gfp的光激發(fā)嗎？

ZsGreen熒光蛋白是1999年發(fā)表的一種堿性（本構熒光）綠色熒光蛋白，來(lái)源于Zoanthus sp.。ZsGreen熒光蛋白激發(fā)波長(cháng)(EX)是496nm，發(fā)射波（EM）是506nm。ZsGreen熒光蛋白是用藍光激發(fā)，發(fā)出綠色熒光。

ZsGreen1?#20197;?05納米處具有發(fā)射峰的珊瑚礁珊瑚蛋白已被引入，以替代增強型綠色熒光蛋白。當在哺乳動(dòng)物細胞中表達時(shí)，ZsGreen1相對于EGFP明亮，但在產(chǎn)生融合突變體方面的作用有限，并且與其他珊瑚礁蛋白類(lèi)似，具有形成四聚體的趨勢。

ZsGreen is a basic (constitutively fluorescent) green fluorescent protein published in 1999, derived from Zoanthus sp..

ZsGreen熒光蛋白的激發(fā)光波長(cháng)和發(fā)射光波長(cháng)的光譜圖

zsgreen和gfp的區別

由上圖可以看出，ZsGreen熒光蛋白和GFP、eGFP的激發(fā)光波長(cháng)是一樣的，所以，zsgreen可以用gfp的光激發(fā)，ZsGreen熒光蛋白和GFP、eGFP的區別是ZsGreen熒光更亮。

上圖：GFP在煙草葉片上的表達

為什么紫外線(xiàn)燈（UV）能激發(fā)GFP的熒光？

野生型綠色熒光蛋白wtGFP

野生型GFP（wild type GFP, wtGFP）從一開(kāi)始就引起了人們極大的興趣，而且被用作新型的簡(jiǎn)單報告基因及體內標記，但GFP在異源生物體中的表達并非那么簡(jiǎn)單。例如，研究人員很早就發(fā)現需要在較高的溫度下孵育才能在細胞或生物體中表達GFP，并且wtGFP在37℃的熱穩定性差。這些都阻礙了它在轉基因中的應用。這些難題促使人們進(jìn)一步篩選分離wtGFP的變體。現在，人們已經(jīng)找到了熒光強度更強且更耐熱的變體。這些變體多數為經(jīng)突變的脫輔基蛋白，它們可防止高溫導致的錯誤折疊。近年來(lái)出現的新型wtGFP基因突變體的激發(fā)和發(fā)射譜發(fā)生了改變，熱穩定性和熒光強度得到了提高，GFP報告基因在小鼠中的應用就是以這些變體作為基礎的。

上圖為：wtGFP的激發(fā)光發(fā)射光光譜圖

增強型綠色熒光蛋白（EGFP）

現在，應用最為廣泛的是紅移變體增強型GFP（EGFP）。諸如EGFP這些紅移變體的更大激發(fā)峰發(fā)生紅向移動(dòng)，大約為490nm，這一波長(cháng)也恰好是多數分光設備、流式細胞儀及共聚焦顯微鏡的常用波長(cháng)。EGFP有兩個(gè)?#34987;?#37240;突變，當被藍光激發(fā)時(shí)，它發(fā)出的熒光要比wtGFP亮30-40倍。wtGFP和包括EGFP在內的多數變體半衰期長(cháng)，所以不適合追蹤表達的減少或損耗。

上圖為：eGFP的激發(fā)光發(fā)射光光譜圖

由上圖可以看出來(lái)，wtGFP、avGFP的主要激發(fā)波長(cháng)在紫外線(xiàn)波段，所以，用紫外線(xiàn)燈能夠觀(guān)察到GFP的熒光，但如果是增強型的綠色熒光蛋白，如egfp、mGFP、ZsGreen，用紫外線(xiàn)是無(wú)法激發(fā)出熒光的，必須用析浦科學(xué)的488nm的藍光手電筒才可以激發(fā)。所以，在觀(guān)察綠色熒光蛋白之前，必須先搞清楚是哪種熒光蛋白，再選擇具體合適的熒光手電筒。

如果要觀(guān)察綠色熒光蛋白（GFP、eGFP、avGFP、ZsGreen)的表達，析浦科學(xué)儀器公司生產(chǎn)的便攜式熒光蛋白激發(fā)光源可以選擇GFPfinder-2101RB和GFPfinder-2102RG系列雙波長(cháng)熒光蛋白激發(fā)光源。綠色熒光蛋白采用析浦科學(xué)儀器公司的藍光手電筒激發(fā)，佩戴LUV-30A黃色觀(guān)察眼鏡觀(guān)察，如希望提供更多詳細信息，可直接聯(lián)系析浦.

上圖為GFPfinder-2101熒光手電筒

析浦（上海）科學(xué)儀器有限公司是專(zhuān)業(yè)從事實(shí)驗室科學(xué)儀器自主研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售和服務(wù)一體的企業(yè)，擁有專(zhuān)業(yè)的產(chǎn)品研發(fā)人員和銷(xiāo)售服務(wù)團隊。公司主營(yíng)實(shí)驗儀器有紫外交聯(lián)儀、紫外透射儀、藍光透射儀、紫外燈、旋渦混合器、紫外光源等，公司研發(fā)多種款式光源，誠征各省市分銷(xiāo)商。